Razlučivanje podjedinica trombinskog enzima Agapurina iz otrova Agkistrodon halys i sekvenciranje aminokiselinskih ostataka

[Sažetak] Cilj Određivanje N-terminalnih 15 aminokiselinskih ostataka dvije slične podjedinice Agacutina.Dvije podjedinice molekula enzima moraju se podijeliti da bi se dobio jedan peptidni lanac podjedinice i sekvencionirao.Metode Visoko prečišćeni Agacutin je dobijen biohemijskom metodom.Uzorci pojedinačnih podjedinica za identifikaciju i sekvenciranje pripremljeni su odvajanjem SDS-PAGE elektroforezom, obnavljanjem podjedinične adhezivne trake i tehnologijom elektrotransfera PVDF membrane.Potonji je odredio 15 aminokiselinskih ostataka na N-terminalu podjedinice metodom Edman degradacije.Rezultati Sekvenca velike podjedinice (16 kDa) bila je DCSSGWSSYEEHQYY, a male podjedinice (15 kDa) je bila DSSGWSSYEGHEYYV.Zaključak Rezultati sekvenciranja su pokazali da je Agacutin novi trombin sličan enzimu zmijskog otrova pretraživanjem NCBI baze podataka.